Study hall-Pre10

1- يبدء الانتساخ عند +1 2-رامز البدء AUG والرنا حامل الشيفرة المعاكسة اذا أخدنا متمم بصير الرامز UAC 3-رامزة التوقف ما بترمز لحمض أميني وما الا شيفرة معاكسة عالرنا الناقل فالجواب D 4- RT-BCR السبب هون الدنا فيه انترون وتقانة RT-BCR بنحصل على متمم دنا حاوي على الاكسونات فقط + بالاستبعاد كل التقانات الموجودة بتكشف عن وجود طفرة الpcr التقليدي كان بنكشف عن طفرة بالمعالجة الانزيمية 5-الجواب111 رامز في بعد بعد الرامز 110 رامزةتوقف 6- fish افضل تقانة للكشف عن اليل جين ما هي تقانة fish (دائما بيجي هاد السؤال) 7-بنلاحظ عالرنا المرسال الرامزة GUG بكون رقما 63 يعني النكليوتيد الأول بالرامزة G بكون رقمو 187 والطفرة بعد الغوانين بنكليوتيدين للتعبير عن استبدال نكليوتيد بالانترون بنحط رقم اخر نكليوتيد بالاكسون قبل الانترون يعني 187 والاستبدال صار بعد الغوانين بنكليوتيدين يعني بنحط يلي(+) 187+2TtoG 8-استبدال Gب T يعني موقع التضفير رح يغيب عند 5َو3َ وغياب موقع التضفير 5َ بسبب ادخال جزء من الانترون لأن جسيم التضفير رح يتجاوز المنطقة بدون ما يقص عند 5َ للانترون فالجواب الخطأ هو حذف اكسون والباقي صح لان رح يصير خلل بالتضفير ورح يتغيروا الروامز فرح ينتج بروتين مغاير للبروتين الاصلي وكمان رح يدخل انترون ببنية الرنا المرسال 9-التسلسل AAUAAA بالموقعUTR 3َ وهو بكون صعدا من موقع شطر الرنا المرسال ب11-30. نكليوتيد 10- ادخال رامز يعني 3 نكليوتيدات وهاد ما بياثر عالنكليوتيدات يلي قبل أو بعد وبيترجم وبينتج بروتين بحمض أميني زائد عن البروتين الاصلي اي بروتين جديد والتعبير الجيني رح يتغير وB خطأ لانو الانزياح مقصود فيه انو تتالي نكليوتيدي بالرنا رح يترمز بشكل مختلف وهون الرامز يلي نضاف ما رح يأثر عالتتاليات يلي قبل أو بعد 11- حذف T رح يسبب تغير بالتسلسل النكليوتيدي ورح يختلف اطار الترجمة والطفرة هون اسما طفرة انزياح الإطار وطفرة انزياح الاطار عاجلا ام اجلا رح تنتج بعدا طفرة هرائية ويصير بعد الرامز 63 الجديد رامزة توقف وتصير هون النهاية الامينية والجواب بكون c ويصير ما اخترنا A لأن النهاية الامينية بتكون باول البروتين 12-هون A,B,D, صح بس الخيار الااصح هو Aلان بدون ناقل الغوانين مافي غوانين يعني ما في قلنسوة والانزيمات التانية ما بتقوم بعملها 13-تعديل الرنا هو استبدال أحد النكليوتيدات بيوراسيل حصرا وبالخيار A,B,C عم يصير تبديل بأماكن  النكليوتيدات مو استبدال نكليوتيد بتاني فالجواب ما ضل غير D 14- الانترونات لا تترجم 15 - العصابة هيي الرمز الرابع بكتابة موقع لجين فالعصابة 2 يعني موقع 4 وذراع طويل q بكون الموقع بالكتابة 2 للصبغي 7 اول شي بينكتب باقي الخيارات العصابة عم تكون 1 وبس الخيار c عم تكون العصابة 2 فالخيار c الصح

مسألة pre 8 المتعلقة بالفصول من 3 إلى 8:

🔰عند استخدام تقانة Dhplc في كشف طفرة فقرة الدم المنجلي يتشكل ثلاث قمم وليس أربعة 🔰في تقانة pcr لمعرفة عدد الشدف الكلية نستخدم قانون 2 للاس n لمعرفة عدد الشدف النقية اي الحاوية فقط على التسلسل المراد الكشف عنه نستخدم قانون 2 للاس n ناقص 2n 🔰 الانزيم المخرب للرنا في RT- pcr هو تلريبونكلياز H 🔰في تقانة Q- PCR محور y يمثل شدة الفلورة محور x يمثل عدد دورات التضخيم 🔰انزيم الاقتطاع ecori يشطر التسلسل 5َGAATTC3َ ما بين الغوانين والادنين 🔰عند تاشيب جين بيتا غلوبين مع بلاسميد الجراثيم نحصل على ثلاث حالات: ¹-في حالة بلاسميد ماشوب تنمو الجراثيم ونحصل على مستعمرات بيضاء ²- بلاسميد غير ماشوب : تنمو الجراثيم وتكون المستعمرات زرقاء ³-في حال وضع الجين دون البلاسميد في الجراثيم : تموت الجراثيم 🔰في تسلسل سانغر نقرأ التسلسل المتمم للطاق المرصاف المراد سلسلته من القطب الموجب للهلامة إلى القطب السالب ثم بعدها نجد بعدها تسلسل الطاق المرصاف بحيث يكون متمم للطاق المصطنع ومعاكس له بالقطيبة 🔰بالنسبة لجين ABL و BCR - الخلية الطبيعية تحوي اشارتين خضراء بسبب وجود اليلين لجين BCR على الصبغي 22 وتحوي اشارتين حمراء بسبب وجود اليلين لجين ABL على الصبغي 9 - أما الخلية الورمية فتحوي أما على إشارة صفراء نتيجة اندماج الجينتين ABL,BCR أو اشارتين حمراء وخضراء متجاورتين وتحوي أيضا على إشارة حمراء واشارة خضراء 🔰في تجربة النعجة دولي يتم إزالة النواة من الخلية في الطور G0

🔰تحتاج إلى : - خلايا مثبتة على صفيحة زجاجية - مجهر مفلور - المسابير المستخدمة فيها : ¹-ساتلة: ترتبط بمناطق في القسيم المركزي ²- نوعية : لتحري تتاليات نوعية مثال: تحري التتالي النوعي لجين ABL,وجين BCR ³- مسابر الرسم: لتمييز الصبغيات عن بعضها البعض 🌬تستخدم تقانة FISH في : ¹- تحديد مواقع نوعية للدنا والرنا ²- وسيلة تشخيصية جزيئية ³-الكشف عن العوامل الممرضة كالجراثيم والفيروسات ⁴- تحديد نوع الصبغي ⁵-اظهار تضخيم ( تضاعف ) الجين الشاذ في بعض الأورام الصلبة ⁶- تحديد الخلايا الورمية ⁷- تستخدم في الكشف عن صبغي فيلادلفيا( تعد الافضل في الكشف) ⁸-التحري عن الائل جين ⁹-تحديد مواضع الجينات على الصبغيات 🔰تقانة المصفوفات الصغرية: -تعتمد هذه التقانة على ¹- ربط كثير من شدف الدنا المتممة لقطع من الجينات على صفائج زجاجية(بقع صغرية ²-تهجين هذه الشدف مع عينات موسومة من الدنا المتمم CDNA ³- إجراء قياس كمي لشدة الإشارة الصادرة مما يعكس كمية الرنا (أو CDNA) المرتبطة بالتسلسلات المتممة 🌬استخدامات تقانة المصفوفات الصغرية : -مقارنة التعبير الجيني لعدد.كبير من الجينات في آن معا بين مجموعتين من الخلايا ( أو تحديد التعبير الجيني التفاضلي) ❗️WARN❗️: Q-pcr : كانت لجين اذا ورد بنص السؤال كلمة عدد من الجينات الخيار :المصفوفات الصغرية 🔰المعاملة الانزيمية لنواتج تفاعل PCR : ¹- اذا كانت المعاملة بانزيمات الاقتطاع نستطيع من خلالها: التمييز بين متماثل الالائل طبيعي (بري) أو طافر و متخالف الالائل (بالنسبة الطفرة) ²- اذا كانت المعاملة بانزيم النكلياز : نستطيع من خلالها الكشف عن متغاير الالائل فقط ❗️ولا يمكننا التمييز بين متماثل الالائل طبيعي ومتماثل الالائل طافر 🔰تقانة DHplc : -تستخدم هذه التقانة طورين: الطور الثابت ويتكون من مادة البوليستيرين الطور المتحرك ويتكون مادة الاسيتو نتريل - تستخدم مادةTEAA لربط الدنا بالطور الثابت في ظروف غير ممسخة درجة حرارة أقل من 50: تشطف قطع الدنا تبعا لحجمها القطع الصغيرة ذات زمن احتفاظ اقل في ظروف ممسخة : يمكن التمييز بين قطعتي دنا لهما الحجم نفسه لكن يتخلفان عن بعضهما البعض بزوج نكليوتيدي 🌬تستخدم تقانة DHplc في : ¹- كشف الطفرة النقطية ²- التمييز بين قطعتي الدنا لهما الحجم نفسه ³- القدرة على الفصل بين المثنويات المتغايرة المتشكلة في حالة تغاير اللواقح للطفرات 🔰تقنية تحليل منحني الانصهار MCA: - تستخدم نواتج تفاعل Q-PCR - تعرض تلك النواتج لدرجات حرارة عالية متزايدة لفصل طاقي الدنا - عند تعريض هذه الجزيئات للحرارة تنخفض شدة الفلورة - إثر انخفاض شدة الفلورة ينتج لدينا منحني الانصهار - للمقارنة بين الأشخاص نستخدم نقطة الانصهار وهي : درجة الحرارة التي تكون عندها نصف جزيئة الدنا ثنائي الطاق ونصفها الآخر أحادي - النمط متماثل الالائل طبيعي وطافر تظهر نقطة انصهار واحدة - النمط متخالف الالائل تظهر نقطتي انصهار 🌬تستخدم تقانة MCA في : ¹ - الكشف عن وجود طفرة ²- التمييز بين النمطين متماثل الالائل طبيعي أو طافر والنمط متخالف الالائل 🔰هام❗️: التقانات التي تمكننا من تحديد نوع النكليوتيد المستبدل أو المضاف أو المحذوف في جزيئة الدنا هي تقانات: تقانات التهجين وسلسلة الدنا 🔰تقانة إقصاء الجين gene knock out تفيد في : كشف تأثير غياب منتج في الفأر 🔰تقانة إضافة الجين gene knock in تفيد في: كشف تأثير إضافة جين بشرية إلى فأر أو دراسة وظيفة جين بشري Transgenic mouse: هي الفئران التي تلقت جينا غريبا عنها 🔰تسمى الكائنات التي تجرى عليها هذه التعديلات بالكاىنات المحورة جينيا : - مصطلح الكائنات المحورة جينيا GMOS وهي كائنات: - اضيف أو حذف لها جين - اكتسبتت صفات مرغوبة - أصبحت  اكثر مقاومة 🔰تفيد تقانة الاستنساخ التكاثري في : - الحصول على كائن ذي  صفات وراثية معروفة مسبقا 🔰تفيد تقانة الاستنساخ العلاجي : - الحصول على خلايا جذعية معروفة الصفات لتجديد النسج 🔰تفيد تقانة الصيدلة الجينية : -الحصول على منتجات حيوانية غنية بهرمونات بشرية ❗️هدول مهمين جدا ❗️(صارت جريدة)😂 🔰اذا حذف أحد اليلي جين افضل طريقة لمعرفة ذلك عند الفرد هي تقانة fish 🔰اذا حدثت طفرة في الانترون فإن الطرق التي لا تصلح لمعرفة وجودها هي: -RT-PCR لانه يكشف عن جزيئات الرنا المرسال الناضج غير الحاوي على انترونات 🔰في الاستنساخ التكاثري يتم دمج نواة خلية جسدية مع بيضة مخصبة منزوعة النواة ومن ثم زرعها في الرحم 🔰في الاستنساخ العلاجي تزرع نواة خلية جسدية  في خلية مخصبة منزعة النواة ولا يتم زرعها  في الرحم 🔰تقانة MCA تتشابه مع Q-PCR بوجود صبغات مفلورة - تختلف عن Dhplc بوجود صبغات مفلورة 🔰في تقانة dhplc تتشكل قمم حيث تشكل كل قمة زمن الاحتفاظ لكل جزيئة مما يعكس وزنها الجزيري - الجزيئات الأصغر تكون قمتها اولا

ملاحظات الفصل التامن وراثة ❤️☃️ 🔰تفاعل pcr يتم بثلاث خطوات وكل ثلاث خطوات تمثل دورة ويجرى من25 ل30 دورة كل دورة تضم ¹- تمسخ بدرجة حرارة 94-95 وتكون منها 15 ثانية / ²- ارتباط يتم بدرجة حرارة 50-60 مدتها 30 ثانية ³- إطالة ويتم بدرجة حرارة 72 مدتها 90 ثانية - تفاعل pcr يعتمد على الحرارة ويجرى خارج الجسم في جهاز المدور الحراري 🔰نستفيد من pcr في : -الكشف عن وجود طفرات من خلال: ¹-التغير في طول نواتج التفاعل في حالات الخبن والاقحام في حال كان كبيرا  ²- للكشف عن متغاير الالائل باستخدام انزيمات النكلياز غير النوعية 🌬نستفيد من pcr أيضا في : - تأمين عدد نسخ كبير من شدف الدنا - الكشف عن تسلسلات معينة - الكشف عن وجود أمراض وراثية 🔰في جهاز الرحلان الكهربائي ترحل الجزيئات من القطب السالب إلى الموجب - كلما كانت ذات وزن جزيئي اصغر اتجهت إلى القطب الموجب بشكل أكبر تستخدم هلامتي الاغاروز وبولي اكريل اميد - هلامة بولي اكريل اميد ذات قدرة ميز عالية أكثر من هلامة الاغاروز ولكنها أكثر تكلفة وأكثر سمية وتحتاج للوقت والجهد 🔰متمم الدنا CDNA نحصل عليه من تفاعل RT- PCR  ويكون حاوي على الاكسونات فقط 🔰 استخدامات RT-PCR: ¹- الكشف عن الإصابة الجرثومية ²- الحصول على دنا متمم من رنا مرسال 🔰تكمن المشكلة في تفاعل pcr التقليدي بعدم القدرة على تحديد عدد النسخ البدئية 🔰Q- PCR - أحد تطبيقات pcr - ساعد في حل مشكلة pcr التقليدي - نستخدم للكشف عن نواتج التفاعل صبغات مفلورة 🌬من تطبيقات Q-PCR : -قياس العدد البدئي لنسخ الدنا - الكشف عن شدة الإصابة الفيروسية -مقارنة التعبير الجيني لجين ما بين جمهرتين خلويتين مختلفتين - دراسة التعبير الجيني لخلية ما كميا ولحظيا 🌬الدورة العتبة في تفاعل Q- PCR : - تستخدم للمقارنة بين العينات عن طريق رؤية اي من العينات تجاوز مستوى الفلورة البدئي اولا - الدورة العتبة تتناسب عكسا مع تراكيز الدنا - كلما كان عدد النسخ اكبر هذا يعني عدد دورات اقل = دورة عتبة اقل = شدة إصابة اكبر 🔰تقانة الدنا المأشوب: - يستخدم فيها الانزيمات : الليغاز لوصل الجزيئتين /- انزيم اقتطاع - لا يستخدم فيها انزيم بولميراز رنا أو دنا - الموقع المرمز لبروتين الصاد الحيوي يفيد في - معرفة الجراثيم التي قبلت البلاسميدات - لا يفيد في تمييز البلاسميد الذي قبل دنا غريب عن البلاسميد الطبيعي (غير المأشوب) 🌬تفيد تقانة الدنا المأشوب في : -تضخيم الجين عبر تضاعف البلاسميد - انتاج بروتينات بشرية مأشوبة ذات تطبيقات علاجية وإنتاج انزيمات ذات استخدام دوائي 🔰سلسلة الدنا : - يعتد تفاعل السلسة على وجود منهيات التفاعل منهيات التفاعل: نكليوتيدات غير حاوية على هيدروكسيل في الكربون 2َو3َ وتوقف تفاعل البلمرة 🌬تقنية الجيل التالي للسلسة NGS: -اعتمدت على استخدام رقاقات من الدنا - توفر الوقت والمال وتحدد التسلسل النكليوتيدي للمجين وتتم في اقل من اسبوع واحد 🌬تفيد كل من تقانة السلسلة والجيل التالي للسلسة NGS في : -كشف طفرة نقطية - الكشف عن الطفرة في التسلسل النكليوتيدي - تحديد جزء من التسلسل النكليوتيدي للجين - تحديد كامل تسلسل الجين -تحديد تسلسل المجين كامل 🔰تقانات التهجين : - تهدف للكشف عن الجزيئات مثل دنا ورنا بروتين - تتطلب التالي : ¹- إجراء رحلان كهربائي ²-وسم الجزيئات الكاشفة(مسابير موسومة أو اضداد موسومة) من تطبيقاتها: ¹- تبقيع ساوثرن : - تختص هذه التقانة بالكشف عن جزيئات الدنا - الهلامة المستخدمة هي الاغاروز الغشاء من النايلون ووقاء التبقيعNAOH 🌬 تستخدم تقنية تبقيع ساوثرن بالتالي: -التحري عن الدنا عن طريق الارتباط ما بين المسبار والتتالي النوعي الخاص به - نستخدم انزيمات اقتطاع -تحري الطفرات في الدنا -الكشف عن عدد نسخ الجين الناتج عن شذوذات وراثية ²- تبقيع نورثرن : - تتحرى جزيئات الرنا -الهلامة المستخدمة : الاغاروز الغشاء المستخدم : غشاء من النايلون - لا يستخدم انزيمات اقتطاع اي جزيئات الرنا لا تقطع 🌬تستخدم تقانة تبقيع نورثرن في : -تحري وجود جزيئات من الرنا - مقارنة التعبير الجيني للخلايا نفسها ( قبل وجود المحفز وبعد) - مقارنة التعبير الجيني بين خلية طبيعية وخلية سرطانية 🔰تقانة تبقيع ويسترن : - للكشف عن البروتينات - الهلامة المستخدمة: اكريل اميد - الغشاء المستخدم : نترو سيللوز - يتم الاستعانة بتيار كهربائي -لا نستخدم مسابير موسومة بل أضداد موسومة 🌬تستخدم تقانة تبقيع ويسترن في : -التحري والكشف عن وجود بروتينات - مقايسة التعبير الجيني لجين ما عن طريق كشف عدد البروتينات - الكشف عن فعالية البروتين باستخدام أضداد نوعية به 🔰تقانة التهجين التألقي في الموضع أو FISH : - تقانة وراثية خلوية وجزيئية -يمكن تطبيقها في مختلف أطوار الدورة الخلوية - تزود بدرجة عالية من الميز وتحتفظ بالمعلومات الوراثية للخلية ( لا يوجد شطر)

🔰عند استخدام تقانة Dhplc في كشف طفرة فقرة الدم المنجلي يتشكل ثلاث قمم وليس أربعة 🔰في تقانة pcr لمعرفة عدد الشدف الكلية نستخدم قانون 2 للاس n لمعرفة عدد الشدف النقية اي الحاوية فقط على التسلسل المراد الكشف عنه نستخدم قانون 2 للاس n ناقص 2n 🔰 الانزيم المخرب للرنا في RT- pcr هو تلريبونكلياز H 🔰في تقانة Q- PCR محور y يمثل شدة الفلورة محور x يمثل عدد دورات التضخيم 🔰انزيم الاقتطاع ecori يشطر التسلسل 5َGAATTC3َ ما بين الغوانين والادنين 🔰عند تاشيب جين بيتا غلوبين مع بلاسميد الجراثيم نحصل على ثلاث حالات: ¹-في حالة بلاسميد ماشوب تنمو الجراثيم ونحصل على مستعمرات بيضاء ²- بلاسميد غير ماشوب : تنمو الجراثيم وتكون المستعمرات زرقاء ³-في حال وضع الجين دون البلاسميد في الجراثيم : تموت الجراثيم 🔰في تسلسل سانغر نقرأ التسلسل المتمم للطاق المرصاف المراد سلسلته من القطب الموجب للهلامة إلى القطب السالب ثم بعدها نجد بعدها تسلسل الطاق المرصاف بحيث يكون متمم للطاق المصطنع ومعاكس له بالقطيبة 🔰بالنسبة لجين ABL و BCR - الخلية الطبيعية تحوي اشارتين خضراء بسبب وجود اليلين لجين BCR على الصبغي 22 وتحوي اشارتين حمراء بسبب وجود اليلين لجين ABL على الصبغي 9 - أما الخلية الورمية فتحوي أما على إشارة صفراء نتيجة اندماج الجينتين ABL,BCR أو اشارتين حمراء وخضراء متجاورتين وتحوي أيضا على إشارة حمراء واشارة خضراء 🔰في تجربة النعجة دولي يتم إزالة النواة من الخلية في الطور G0

🔰تحتاج إلى : - خلايا مثبتة على صفيحة زجاجية - مجهر مفلور - المسابير المستخدمة فيها : ¹-ساتلة: ترتبط بمناطق في القسيم المركزي ²- نوعية : لتحري تتاليات نوعية مثال: تحري التتالي النوعي لجين ABL,وجين BCR ³- مسابر الرسم: لتمييز الصبغيات عن بعضها البعض 🌬تستخدم تقانة FISH في : ¹- تحديد مواقع نوعية للدنا والرنا ²- وسيلة تشخيصية جزيئية ³-الكشف عن العوامل الممرضة كالجراثيم والفيروسات ⁴- تحديد نوع الصبغي ⁵-اظهار تضخيم ( تضاعف ) الجين الشاذ في بعض الأورام الصلبة ⁶- تحديد الخلايا الورمية ⁷- تستخدم في الكشف عن صبغي فيلادلفيا( تعد الافضل في الكشف) ⁸-التحري عن الائل جين ⁹-تحديد مواضع الجينات على الصبغيات 🔰تقانة المصفوفات الصغرية: -تعتمد هذه التقانة على ¹- ربط كثير من شدف الدنا المتممة لقطع من الجينات على صفائج زجاجية(بقع صغرية ²-تهجين هذه الشدف مع عينات موسومة من الدنا المتمم CDNA ³- إجراء قياس كمي لشدة الإشارة الصادرة مما يعكس كمية الرنا (أو CDNA) المرتبطة بالتسلسلات المتممة 🌬استخدامات تقانة المصفوفات الصغرية : -مقارنة التعبير الجيني لعدد.كبير من الجينات في آن معا بين مجموعتين من الخلايا ( أو تحديد التعبير الجيني التفاضلي) ❗️WARN❗️: Q-pcr : كانت لجين اذا ورد بنص السؤال كلمة عدد من الجينات الخيار :المصفوفات الصغرية 🔰المعاملة الانزيمية لنواتج تفاعل PCR : ¹- اذا كانت المعاملة بانزيمات الاقتطاع نستطيع من خلالها: التمييز بين متماثل الالائل طبيعي (بري) أو طافر و متخالف الالائل (بالنسبة الطفرة) ²- اذا كانت المعاملة بانزيم النكلياز : نستطيع من خلالها الكشف عن متغاير الالائل فقط ❗️ولا يمكننا التمييز بين متماثل الالائل طبيعي ومتماثل الالائل طافر 🔰تقانة DHplc : -تستخدم هذه التقانة طورين: الطور الثابت ويتكون من مادة البوليستيرين الطور المتحرك ويتكون مادة الاسيتو نتريل - تستخدم مادةTEAA لربط الدنا بالطور الثابت في ظروف غير ممسخة درجة حرارة أقل من 50: تشطف قطع الدنا تبعا لحجمها القطع الصغيرة ذات زمن احتفاظ اقل في ظروف ممسخة : يمكن التمييز بين قطعتي دنا لهما الحجم نفسه لكن يتخلفان عن بعضهما البعض بزوج نكليوتيدي 🌬تستخدم تقانة DHplc في : ¹- كشف الطفرة النقطية ²- التمييز بين قطعتي الدنا لهما الحجم نفسه ³- القدرة على الفصل بين المثنويات المتغايرة المتشكلة في حالة تغاير اللواقح للطفرات 🔰تقنية تحليل منحني الانصهار MCA: - تستخدم نواتج تفاعل Q-PCR - تعرض تلك النواتج لدرجات حرارة عالية متزايدة لفصل طاقي الدنا - عند تعريض هذه الجزيئات للحرارة تنخفض شدة الفلورة - إثر انخفاض شدة الفلورة ينتج لدينا منحني الانصهار - للمقارنة بين الأشخاص نستخدم نقطة الانصهار وهي : درجة الحرارة التي تكون عندها نصف جزيئة الدنا ثنائي الطاق ونصفها الآخر أحادي - النمط متماثل الالائل طبيعي وطافر تظهر نقطة انصهار واحدة - النمط متخالف الالائل تظهر نقطتي انصهار 🌬تستخدم تقانة MCA في : ¹ - الكشف عن وجود طفرة ²- التمييز بين النمطين متماثل الالائل طبيعي أو طافر والنمط متخالف الالائل 🔰هام❗️: التقانات التي تمكننا من تحديد نوع النكليوتيد المستبدل أو المضاف أو المحذوف في جزيئة الدنا هي تقانات: تقانات التهجين وسلسلة الدنا 🔰تقانة إقصاء الجين gene knock out تفيد في : كشف تأثير غياب منتج في الفأر 🔰تقانة إضافة الجين gene knock in تفيد في: كشف تأثير إضافة جين بشرية إلى فأر أو دراسة وظيفة جين بشري Transgenic mouse: هي الفئران التي تلقت جينا غريبا عنها 🔰تسمى الكائنات التي تجرى عليها هذه التعديلات بالكاىنات المحورة جينيا : - مصطلح الكائنات المحورة جينيا GMOS وهي كائنات: - اضيف أو حذف لها جين - اكتسبتت صفات مرغوبة - أصبحت  اكثر مقاومة 🔰تفيد تقانة الاستنساخ التكاثري في : - الحصول على كائن ذي  صفات وراثية معروفة مسبقا 🔰تفيد تقانة الاستنساخ العلاجي : - الحصول على خلايا جذعية معروفة الصفات لتجديد النسج 🔰تفيد تقانة الصيدلة الجينية : -الحصول على منتجات حيوانية غنية بهرمونات بشرية ❗️هدول مهمين جدا ❗️(صارت جريدة)😂 🔰اذا حذف أحد اليلي جين افضل طريقة لمعرفة ذلك عند الفرد هي تقانة fish 🔰اذا حدثت طفرة في الانترون فإن الطرق التي لا تصلح لمعرفة وجودها هي: -RT-PCR لانه يكشف عن جزيئات الرنا المرسال الناضج غير الحاوي على انترونات 🔰في الاستنساخ التكاثري يتم دمج نواة خلية جسدية مع بيضة مخصبة منزوعة النواة ومن ثم زرعها في الرحم 🔰في الاستنساخ العلاجي تزرع نواة خلية جسدية  في خلية مخصبة منزعة النواة ولا يتم زرعها  في الرحم 🔰تقانة MCA تتشابه مع Q-PCR بوجود صبغات مفلورة - تختلف عن Dhplc بوجود صبغات مفلورة 🔰في تقانة dhplc تتشكل قمم حيث تشكل كل قمة زمن الاحتفاظ لكل جزيئة مما يعكس وزنها الجزيري - الجزيئات الأصغر تكون قمتها اولا

ملاحظات الفصل التامن وراثة ❤️☃️ 🔰تفاعل pcr يتم بثلاث خطوات وكل ثلاث خطوات تمثل دورة ويجرى من25 ل30 دورة كل دورة تضم ¹- تمسخ بدرجة حرارة 94-95 وتكون منها 15 ثانية / ²- ارتباط يتم بدرجة حرارة 50-60 مدتها 30 ثانية ³- إطالة ويتم بدرجة حرارة 72 مدتها 90 ثانية - تفاعل pcr يعتمد على الحرارة ويجرى خارج الجسم في جهاز المدور الحراري 🔰نستفيد من pcr في : -الكشف عن وجود طفرات من خلال: ¹-التغير في طول نواتج التفاعل في حالات الخبن والاقحام في حال كان كبيرا  ²- للكشف عن متغاير الالائل باستخدام انزيمات النكلياز غير النوعية 🌬نستفيد من pcr أيضا في : - تأمين عدد نسخ كبير من شدف الدنا - الكشف عن تسلسلات معينة - الكشف عن وجود أمراض وراثية 🔰في جهاز الرحلان الكهربائي ترحل الجزيئات من القطب السالب إلى الموجب - كلما كانت ذات وزن جزيئي اصغر اتجهت إلى القطب الموجب بشكل أكبر تستخدم هلامتي الاغاروز وبولي اكريل اميد - هلامة بولي اكريل اميد ذات قدرة ميز عالية أكثر من هلامة الاغاروز ولكنها أكثر تكلفة وأكثر سمية وتحتاج للوقت والجهد 🔰متمم الدنا CDNA نحصل عليه من تفاعل RT- PCR  ويكون حاوي على الاكسونات فقط 🔰 استخدامات RT-PCR: ¹- الكشف عن الإصابة الجرثومية ²- الحصول على دنا متمم من رنا مرسال 🔰تكمن المشكلة في تفاعل pcr التقليدي بعدم القدرة على تحديد عدد النسخ البدئية 🔰Q- PCR - أحد تطبيقات pcr - ساعد في حل مشكلة pcr التقليدي - نستخدم للكشف عن نواتج التفاعل صبغات مفلورة 🌬من تطبيقات Q-PCR : -قياس العدد البدئي لنسخ الدنا - الكشف عن شدة الإصابة الفيروسية -مقارنة التعبير الجيني لجين ما بين جمهرتين خلويتين مختلفتين - دراسة التعبير الجيني لخلية ما كميا ولحظيا 🌬الدورة العتبة في تفاعل Q- PCR : - تستخدم للمقارنة بين العينات عن طريق رؤية اي من العينات تجاوز مستوى الفلورة البدئي اولا - الدورة العتبة تتناسب عكسا مع تراكيز الدنا - كلما كان عدد النسخ اكبر هذا يعني عدد دورات اقل = دورة عتبة اقل = شدة إصابة اكبر 🔰تقانة الدنا المأشوب: - يستخدم فيها الانزيمات : الليغاز لوصل الجزيئتين /- انزيم اقتطاع - لا يستخدم فيها انزيم بولميراز رنا أو دنا - الموقع المرمز لبروتين الصاد الحيوي يفيد في - معرفة الجراثيم التي قبلت البلاسميدات - لا يفيد في تمييز البلاسميد الذي قبل دنا غريب عن البلاسميد الطبيعي (غير المأشوب) 🌬تفيد تقانة الدنا المأشوب في : -تضخيم الجين عبر تضاعف البلاسميد - انتاج بروتينات بشرية مأشوبة ذات تطبيقات علاجية وإنتاج انزيمات ذات استخدام دوائي 🔰سلسلة الدنا : - يعتد تفاعل السلسة على وجود منهيات التفاعل منهيات التفاعل: نكليوتيدات غير حاوية على هيدروكسيل في الكربون 2َو3َ وتوقف تفاعل البلمرة 🌬تقنية الجيل التالي للسلسة NGS: -اعتمدت على استخدام رقاقات من الدنا - توفر الوقت والمال وتحدد التسلسل النكليوتيدي للمجين وتتم في اقل من اسبوع واحد 🌬تفيد كل من تقانة السلسلة والجيل التالي للسلسة NGS في : -كشف طفرة نقطية - الكشف عن الطفرة في التسلسل النكليوتيدي - تحديد جزء من التسلسل النكليوتيدي للجين - تحديد كامل تسلسل الجين -تحديد تسلسل المجين كامل 🔰تقانات التهجين : - تهدف للكشف عن الجزيئات مثل دنا ورنا بروتين - تتطلب التالي : ¹- إجراء رحلان كهربائي ²-وسم الجزيئات الكاشفة(مسابير موسومة أو اضداد موسومة) من تطبيقاتها: ¹- تبقيع ساوثرن : - تختص هذه التقانة بالكشف عن جزيئات الدنا - الهلامة المستخدمة هي الاغاروز الغشاء من النايلون ووقاء التبقيعNAOH 🌬 تستخدم تقنية تبقيع ساوثرن بالتالي: -التحري عن الدنا عن طريق الارتباط ما بين المسبار والتتالي النوعي الخاص به - نستخدم انزيمات اقتطاع -تحري الطفرات في الدنا -الكشف عن عدد نسخ الجين الناتج عن شذوذات وراثية ²- تبقيع نورثرن : - تتحرى جزيئات الرنا -الهلامة المستخدمة : الاغاروز الغشاء المستخدم : غشاء من النايلون - لا يستخدم انزيمات اقتطاع اي جزيئات الرنا لا تقطع 🌬تستخدم تقانة تبقيع نورثرن في : -تحري وجود جزيئات من الرنا - مقارنة التعبير الجيني للخلايا نفسها ( قبل وجود المحفز وبعد) - مقارنة التعبير الجيني بين خلية طبيعية وخلية سرطانية 🔰تقانة تبقيع ويسترن : - للكشف عن البروتينات - الهلامة المستخدمة: اكريل اميد - الغشاء المستخدم : نترو سيللوز - يتم الاستعانة بتيار كهربائي -لا نستخدم مسابير موسومة بل أضداد موسومة 🌬تستخدم تقانة تبقيع ويسترن في : -التحري والكشف عن وجود بروتينات - مقايسة التعبير الجيني لجين ما عن طريق كشف عدد البروتينات - الكشف عن فعالية البروتين باستخدام أضداد نوعية به 🔰تقانة التهجين التألقي في الموضع أو FISH : - تقانة وراثية خلوية وجزيئية -يمكن تطبيقها في مختلف أطوار الدورة الخلوية - تزود بدرجة عالية من الميز وتحتفظ بالمعلومات الوراثية للخلية ( لا يوجد شطر)

8⃣ الفصل الثامن:

قناة مختصة بشرح مادة الوراثة بأسلوب جيد مع تعزيز الذاكرة البصرية بشكل مجاني🧬🩸 https://t.me/antibodypre9/331

﴿ذلِكَ وَمَن يُعَظِّم شَعائِرَ اللَّهِ فَإِنَّها مِن تَقوَى القُلوبِ﴾

اللّه أكبر اللّه أكبر لا إله إلا اللّه، اللّه أكبر اللّه أكبر وللّه الحمد. ❤️❤️ كل عام وأنتم بخير، تقبّل الله طاعتكم وأجاب دعاءكم وأعاده عليكُم باليُمن والبَركات. مباركٌ عليكم العيد ووفقكم لما فيه صلاح لكم. 🎆🤍

⚜ يوم الغنائم جاء، يوم المغفرة والعتق، يوم إجابة الدعوات.

عن نبيّنا الأكرم ﷺ أنه قال: "صِيَامُ يَومِ عَرَفَةَ، أَحْتَسِبُ علَى اللهِ أَنْ يُكَفِّرَ السَّنَةَ الَّتي قَبْلَهُ، وَالسَّنَةَ الَّتي بَعْدَهُ"

‼️ لا يفوتكم صيامه، لا يفوتكم صيامه، لا يفوتكم صيامه. 👈🏻 جهزوا أمانيكم وآمالكم وانشغلوا بـ"لا إله إلا الله وحده لا شريك له، له الملك وله الحمد، وهو على كل شيء قدير"، أكثروا من الدعاء، أكثروا من الصدقة ولا تنسونا والمسلمين كافةً من الدعاء 🎆🤍.

- لا علاقة لطول الرنا المرسال في ثباتيته 🔰جين الصدمة الحرارية تتالياتها النكليوتيدية هي من بين الاكثر انحفاظا بين الكائنات الحية -يتم تنظيم التعبير عنها على مستوى الانتساخ 🔰الوحدة المنظمة للانتساخ: تحوي المخصض ويمكن أن تحوي معزز أو مسكت - الوحدة الانتساخية : تحوي الجينات المراد انتساخها 🔰عوامل الانتساخ التي لديها بنى مثنوية : مقص اللوسين - حلزون عروة حلزون 🔰المحضض ترتبط به عوامل الانتساخ العامة ويكون ملاصق للجين 🔰 المسكت : معطل لحدوث الانتساخ 🔰المعزز :  يزيد فعالية الانتساخ - ترتبط به عوامل الانتساخ الخاصة -يمكن أن يكون صعدا أو نزلا من الحين ويمكن أن يكون على الطاق المرصاف اوغير المرصاف - المعزز نفسه عنصر الاستجابة الهرمونية 🔰يتشابه كل من المحضض والمعزز بالشكل الفراغي والتركيب الكيميائي وكلاهما يؤثر على التعبير الجيني 🔰جهاز الانتساخ : عوامل الانتساخ العامة المرتبطة على تتالي المحضض 🔰 المعقد الوسيطMeditor complex: - يحوي أكثر من 20 بروتين - يقوم بربط عوامل الانتساخ العوامل والخاصة وبولميراز الرنا مما يؤدي إلى تثبيت جهاز الانتساخ وبولميراز الرنا والشروع بالانتساخ 🔰في غياب المعقد الوسيط لا يحدث اتصال فيزيائي بين جميع البروتينات ولا يتثبت بولميراز الرنا وبالتالي لا يتفعل الانتساخ 🔰انزيم DICER: بقوم بشطر جزئ الرنا المضاعف الطويل إلى جزيئات رنا مضاعفة قصيرة - المعقد RISC : يتشكل عندما ترتبط الجزيئات المضاعفة القصيرة مع البروتينات الريبونكلوتيدية التي تحول الجزيئات إلى أحادية الطاق (sirna,mirna) 🔰الكروماتين الحقيقي منطقة اقل تلونا حاوية على الجينات المرمزة -الكروماتين المغاير منطقة أشد تلونا غير حاوية على بروتينات مرمزة ويكون الدنا ملتف بكثافة على البروتينات - الكروماتين الحقيقي يكون بشكل منطقة كثيفة ذات لون اصفر الكروماتين الغيري يكون بشكل منطقة كثيفة ذات لون بني - النوية منطقة كثيفة في منتصف النواة 🔰اهم العوامل المسيطرة على التخلق المتوالي : استلة الهيستونات ومثيلة الدنا 🔰إعادة نمذجة الكروماتين يتم بوساطة الانزيمات التالية: -ناقلة استيل للهسيتون HAT -نازعة استيل للهيستون HDAC - ناقلة ميتيل للهيستون HMT - قبل إضافة استيل co-ch3 يقوم انزيم كيناز المفسفر بفسفرة قنابل السيرين في الهيستون 4 وبعدها يضاف الاستيل إلى الليزين ويتم ارخاء الكروماتين 🔰يتم إضافة ميتيل إلى الدنا بوساطة الانزيم : ناقلة المتيل الدنا DNMT - تحدث إضافة الميتيل على السيتوزين بجهة 5َ المجاور عالغوانين - جزر GPC  تكثر في المحضض وخصوعها للمتيلة يؤدي إلى تثبيط الانتساخ - يتراوح طول هذه الجزر بين الف والفين شفع أساس - يوجد في المجين البشري نحو 30 الف من هذه الجزر 🔰الجين المسؤولة عن تثبيط الصبغي x هي حين xist تقع في مركز تثبيط الصبغي X أو xic  - تنتج هذه الحين رنا غير مرمز يبلغ طوله 17 الف شفع أساس وهذا الرنا يلتف على الصبغي ويثبطه 🔰صبغيX المثبط يسمى جسيم بار 🔰متيلة محضض جين xist  يؤدي ذلك إلى تثبيط التعبير عن الجين وبالتالي عدم انتساخها وبالتالي تفعيل الصبغي X 🔰في الصبغي X  الفعال تكون جين HPRT  فعالة والتي يساهم منتجها في استقلاب البورينات