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Imported Lassa Fever in Germany Molecular Characterization of a New Lassa Virus Strain
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Imported_Lassa_Fever_in_Germany_Molecular_Characterization_of_a.pdf2.47 KB
Fiebre de Lassa importada en Alemania: Caracterización Molecular de una Nueva Cepa de Virus Lassa - Volumen 6, Número 5—Octubre 2000 - Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes - CDC Origen y Aislamiento de la Nueva Cepa del Virus Lassa ... Detección de AV de Lassa en células Vero infectadas. (A) Inmunofluorescencia con anticuerpo monoclonal específico de NP L2F1 40 horas después prácticamente todas las células se infectaron en cultivos inyectados con 0,1 ml de ... El aislamiento de un virus Lassa se confirmó adicionalmente mediante análisis de inmunotransferencia de células infectadas con la cepa AV utilizando anticuerpo específico de proteína Z del virus Lassa. Se demostró una proteína Z de 11 kDa (Figura 2B) como se ha detectado recientemente en células infectadas con Lassa Josiah (24). Conclusiones El alto grado de variabilidad plantea problemas para el diseño de PCR de diagnóstico y cebadores de secuenciación. La mayoría de nuestros cebadores de secuenciación que fueron diseñados sobre la base de secuencias de la cepa Josiah y Nigeria no lograron unirse a la nueva cepa como resultado de varias mutaciones en sus sitios de unión. Además, el sitio de unión del cebador 80F2 (18), que había sido diseñado para el diagnóstico sobre la base de nueve secuencias de Lassa, contenía tres mutaciones. Como afectaron solo a la mitad 5' del cebador, el rendimiento de la PCR no se redujo seriamente, lo que confirma su utilidad para fines de diagnóstico. La RT-PCR de ARN S de longitud completa puede ser una alternativa para el diagnóstico debido a sus sitios de unión de cebadores altamente conservados, aunque su sensibilidad puede ser algo menor. El análisis filogenético mostró diferencias menores en la topología de árboles de los arenavirus del Viejo Mundo en comparación con el análisis anterior (11). En nuestro análisis, los virus Mobala y Mopeia se colocaron en estrecha relación, mientras que el estudio anterior indicó que Mobala está más estrechamente relacionado con el virus Lassa. Sin embargo, en ambos estudios, el soporte de bootstrap fue bajo y la topología del árbol dependía de la inclusión de cambios en la tercera posición del codón (11). La colocación de Lassa Nigeria, Josiah y LP difería en ambos estudios de manera similar. Es posible que se requiera un análisis de secuencias adicionales para dilucidar la relación filogenética exacta entre los virus Mopeia, Mobala y Lassa, así como entre las cepas del virus Lassa Nigeria, Josiah y LP. El desarrollo de una vacuna contra el virus Lassa es un objetivo principal de la investigación (39). La inmunidad protectora se logra en animales mediante la vacunación con lassa NP o virus vaccinia que expresa GPC y parece estar mediada por la respuesta de las células T (40-42). Sin embargo, aún no se ha estudiado si una vacuna recombinante basada en una sola proteína Lassa de una cepa específica protege de forma cruzada contra cepas heterólogas de Lassa. ‼️Recientemente, se mapearon varios epítopos reconocidos por los clones de células T CD4+ específicos de Lassa NP de una persona (32). La mayoría de ellos se conservan en al menos dos de las tres cepas de Lassa (Josiah, Nigeria y AV). ‼️‼️El número relativamente grande de epítopos de células T reconocidos, así como su conservación parcial, sugiere un nivel de reactividad cruzada de células T que podría ser suficiente para la protección cruzada contra cepas heterólogas después de la inmunización con vacunas basadas en NP. ‼️Esta opinión está respaldada por experimentos con vacunas basadas en GPC de Lassa, ‼️que indican protección cruzada mediada por células T CD4+ incluso contra LCMV (43). Uso de la nueva cepa del virus Lassa como virus de exposición heterólogo después de la inmunización con vacunas recombinantes, así como el uso de sus proteínas en ensayos in vitro para estudiar la reactividad cruzada de células T, ‼️puede mejorar nuestra comprensión de la inmunidad de protección cruzada específica del virus de Lassa. Descarga pdf👇🏽 https://wwwnc.cdc.gov/eid/article/6/10/00-0504_article
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Cross_protection_against_lymphocytic_choriomeningitis_virus_mediated.pdf1.88 MB
Protección cruzada contra el virus de la coriomeningitis linfocítica mediada por un clon de células T CD4+ específico para un epítopo de glicoproteína de envoltura del virus Lassa. - PMC Abstracto Virus vacunal recombinante que expresa el precursor de glicoproteína de la envoltura del virus Lassa (LV), V-LSGPC, se utilizó para estudiar la base de la inmunidad de protección cruzada inducida por LV contra el virus de la coriomeningitis linfocítica del arenavirus estrechamente relacionado (LCMV). Los ratones C3H/HeJ cebados con V-LSGPC no desarrollaron anticuerpos circulantes ni células T citotóxicas CD8+ específicas para LCMV, pero resistieron un desafío de LCMV normalmente letal. Las células de bazo de tales ratones dieron una respuesta proliferativa al LCMV in vitro que era inhibible por el anticuerpo anti-CD4. Los péptidos sintéticos correspondientes a los sitios de células T predichos comunes al precursor de la glicoproteína de la envoltura (GP-C) de LV y el de LCMV se utilizaron para mapear la especificidad de la respuesta proliferativa a un epítopo localizado entre los aminoácidos 403 y 417 de LV GP-C.Se aislaron varios clones de células T CD4+ específicos para el péptido 403-417 y se descubrió que producían interferón gamma en respuesta tanto al péptido como al LCMV. Uno de estos clones, C9, se seleccionó para estudio adicional. C9 lisó las células diana portadoras de I-AK, y cuando se transfirió adoptivamente a ratones C3H/HeJ, fue capaz de mediar tanto una reacción de hipersensibilidad retardada específica del péptido como la resistencia a la exposición letal al LCMV. Estos hallazgos colectivos demuestran, por primera vez, que las células T CD4+ pueden desempeñar un papel importante en la inmunidad de protección cruzada específica del arenavirus.fue capaz de mediar tanto una reacción de hipersensibilidad retardada específica del péptido como la resistencia a la exposición letal al LCMV. Estos hallazgos colectivos demuestran, por primera vez, que las células T CD4+ pueden desempeñar un papel importante en la inmunidad de protección cruzada específica del arenavirus.fue capaz de mediar tanto una reacción de hipersensibilidad retardada específica del péptido como la resistencia a la exposición letal al LCMV. Estos hallazgos colectivos demuestran, por primera vez, que las células T CD4+ pueden desempeñar un papel importante en la inmunidad de protección cruzada específica del arenavirus. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC237696/
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Cross-protection against lymphocytic choriomeningitis virus mediated by a CD4+ T-cell clone specific for an envelope glycoprotein epitope of Lassa virus.

Recombinant vaccinia virus expressing the Lassa virus (LV) envelope glycoprotein precursor, V-LSGPC, was used to study the basis of LV-induced cross-protective immunity against the closely related arenavirus lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV). ...

Caracterización de clones de células T CD4 humanas reconociendo epítopos conservados y variables de la nucleoproteína del virus de Lassa+. Marzo 2000. El grado de conservación de los epítopos inmunodominantes de las células T y/o las regiones de unión al MHC entre diferentes cepas de virus podría ser fundamental para la inmunidad de protección cruzada en una infección controlada predominantemente por células T, como la fiebre de Lassa. Por lo tanto, será importante analizar los epítopos de las células T CD4 en el NP y las glicoproteínas del virus de Lassa presentadas por moléculas comunes del MHC-II. Además, su grado de variación en las variantes naturales del virus de Lassa debería influir en el diseño de vacunas recombinantes contra la fiebre de Lassa.+++ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC111699/
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Characterization_of_Human_CD41_T_Cell_Clones_Recognizing_Conserved.pdf1.21 KB
Caracterización de Clones de Células T CD4+ Humanos Reconociendo Epítopos Conservados y Variables de la Nucleoproteína del Virus Lassa - PMC https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC111699/
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Imported Lassa Fever in Germany:  Molecular Characterization of a New Lassa Virus Strain - Volume 6, Number 5—October 2000 - Emerging Infectious Diseases journal - CDC https://wwwnc.cdc.gov/eid/article/6/10/00-0504_article
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Fiebre de Lassa importada en Alemania:Caracterización Molecular de una Nueva Cepa de Virus Lassa - Volumen 6, Número 5—Octubre 2000 - Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes - CDC https://wwwnc.cdc.gov/eid/article/6/10/00-0504_article
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Patógenos y parásitos: estrategias y desafíos enero de 2000 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1312209/
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Pathogens and parasites strategies and challenges.pdf5.12 KB
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